В ходе выполнения проекта по Соглашению о предоставлении субсидии от 19.09.2014 № 14.578.21.0055 с Минобрнауки России в рамках федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на
- получены культуры ММСК мышей;
- проведена оценка общетоксического воздействия экспериментальных образцов имплантатов по результатам гетеротопной трансплантации;
- получены культуры ММСК крыс;
- проведена оценка эффективности использования экспериментальных образцов имплантатов, не обладающих системной токсичностью, для замещения дефектов костной ткани экспериментальных животных после ортотопической трансплантации;
- подведены итоги этапа. Разработан промежуточный отчет о ПНИ.
- изготовлены экспериментальные образцы имплантатов, насыщенных белковым ростовым фактором и/или ММСК мышей;
- изготовлены экспериментальные образцы имплантатов, насыщенных белковым ростовым фактором и/или ММСК крыс;
- изготовлены партии имплантатов, экспериментальные образцы которых продемонстрировали наибольшую эффективность при ортотопической трансплантации, для использования при проведении работ по информированию общественности о результатах выполнения ПНИ.
При этом были получены следующие результаты:
В ходе выполнения работ на Этапе 4 была получена культура ММСК мышей. В качестве источника ММСК использовали спонгиозную массу костного мозга мышей C57BL/6J. Генерация культуры ММСК сопровождалась оценкой морфологии культуры, цитологических и фенотипических особенностей составляющих ее клеток. Целевая культура характеризуются отсутствием мембранносвязанных маркеров гемопоэтических клеток. Фенотип ММСК 2 пассажа характеризуется как CD34-, CD 45-, CD11high+ CD 105+ СD90low+. Получены ММСК мышей и крыс: 490000 клеток/мл. Нагрузка сингенными или аутологичными клетками может обеспечить улучшение прочностных свойств имплантата. Изготовлены экспериментальные образцы имплантатов путем формирования двухслойных конструкций из высокопористого СВМПЭ и сплошного армирующего слоя СВМПЭ, с последующей стерилизацией сверхкритичным диоксидом углерода при 200 атм, 40оС в течение 15 мин и насыщением пористого слоя белковым ростовым фактором TGF-β и/или мультипотентными мезенхимальными стромальными клетками, выделенными из костного мозга мышей. Изготовлены экспериментальные образцы имплантатов, насыщенных TGFβ и ММСК мышей и крыс. Изготовление партии имплантатов с наибольшей эффективностью при ортотопической трансплантации.
